长链非编码RNA H19调控人肝癌HepG2细胞增殖与凋亡
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右江民族医学院附属医院

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广西自然科学基金资助项目(桂财教2014GXNSFAA118143);2017年度广西医药卫生自筹经费计划课题(桂卫Z20170224);广西科技基地与人才专项(广西肝胆疾病临床医学研究中心研究课题)(桂科 AD17129035); 2017年广西研究生教育创新计划项目(桂学位 YCSW2017214);广西高校桂西地区高发病防治重点实验室开放课题(kfkt2017006)


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    目的 探讨长链非编码RNA H19(lncRNA-H19)能否调控人肝癌细胞HepG2增殖和凋亡。方法 以人肝癌细胞株HepG2作为转染对象,分别设空白对照组(人肝癌细胞HepG2+培养基)、阴性对照组(人肝癌细胞HepG2+培养基+空载体)和沉默组(人肝癌细胞HepG2+培养基+慢病毒);采用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基,培养人肝癌细胞HepG2,使用慢病毒转染技术沉默人肝癌细胞HepG2 的lncRNA-H19表达,荧光实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人肝癌细胞HepG2的lncRNA-H19表达;四甲基偶氮唑盐(Methyl Thiazolyl Tetrazolium,MTT)法检测人肝癌细胞HepG2增殖能力;流式细胞术检测人肝癌细胞HepG2凋亡率。结果 qRT-PCR检测lncRNA-H19的相对表达量:空白对照组(2.648±0.165),阴性对照组(2.226±0.098),沉默组(0.290±0.016),(F=383.961,P<0.01);沉默lncRNA-H19后,MTT法检测人肝癌细胞HepG2吸光度的表达量,作用24小时:空白对照组(0.415±0.024),阴性对照组(0.405±0.008),沉默组(0.562±0.017),作用48小时:空白对照组(0.438±0.017),阴性对照组(0.489±0.056),沉默组(0.780±0.226),作用72小时:空白对照组(0.583±0.013),阴性对照组(0.609±0.007),沉默组(1.045±0.049),(P<0.05),其抑制作用72小时>48小时>24小时,表现为时间依赖;沉默lncRNA-H19后,3次流式细胞术检测细胞凋亡率均数:空白对照组(23.5±2.97),阴性对照组(17.6±2.06),沉默组(3.4±0.97),(F=266.198,P<0.001)。 表明沉默lncRNA-H19可促进肝癌细胞HepG2细胞增殖,抑制细胞凋亡。结论 lncRNA-H19可以调控人肝癌 HepG2细胞的生长,能抑制肝癌细胞HepG2的增殖,其抑制作用呈时间依赖,促进HepG2细胞凋亡。

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  • 收稿日期:2019-01-02
  • 最后修改日期:2019-01-02
  • 录用日期:2019-01-07
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