小鼠NLRP3基因腺病毒干扰载体的构建及功能鉴定
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1.药理学教研室 安徽 芜湖;2.皖南医学院第一附属医院 弋矶山医院 内分泌科

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国家自然科学基金(81600645),安徽省自然科学基金(1708085MH186),国家级大学生创新创业训练计划(201810368021)


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    目的 构建针对小鼠NLRP3基因的腺病毒干扰载体(Ad-NLRP3-shRNA),并在Min6和RAW264.7细胞中验证其基因沉默效率。方法 针对小鼠NLRP3基因设计、合成3对NLRP3 shRNA 1-3干扰序列,重组至pHBAd-U6-CMV质粒载体。在HEK293T细胞内包装Ad-NLRP3-shRNA。感染Min6和RAW264.7细胞后,采用实时定量-聚合酶链式反应(RTQ-PCR)检测NLRP3基因表达。结果Ad-NLRP3-shRNA1-3在Min6和RAW264.7细胞的干扰效率分别达到 44.4%、46.6%和82.8%以及47.2%、49.6%和78.6%。结论 成功构建出Ad-NLRP3-shRNA载体,为研究NLRP3基因的功能提供有效工具。

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  • 收稿日期:2019-09-08
  • 最后修改日期:2019-09-08
  • 录用日期:2019-09-16
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