目的 在细胞水平探究褪黑素通过NRF2对氯胺酮相关性膀胱炎(KC)尿路上皮损伤的保护作用。方法 首先利用Westernblot验证NRF2在氯胺酮刺激后的SV-HUC-1细胞的表达水平变化;构建沉默NRF2的SV-HUC-1细胞株,利用流式细胞术检测氯胺酮共培养后的细胞凋亡率;利用CCK-8筛选褪黑素的工作浓度,将SV-HUC-1细胞分为对照组(CON),氯胺酮组(KET),褪黑素治疗组(KET+褪黑素)和褪黑素组,利用Westernblot检测NRF2、HO-1蛋白表达丰度,利用实时荧光定量PCR检测IL-6mRNA 表达水平,并测定SOD 水平变化情况。结果 氯胺酮共培养后的SV-HUC-1细胞NRF2表达水平显著降低(P <0.001);成功构建沉默NRF2的稳定转染细胞株,si-NRF2组的NRF2表达水平低于si-NC 组(P <0.05);si-NRF2+ 氯胺酮组[(14.717±0.601)%]和si-NC+ 氯胺酮组[(10.890±0.429)%]的细胞凋亡率显著高于si-NC组[(8.560±0.846)%](P <0.01)和si-NRF2组[(9.023±0.703)%](P <0.01);且si-NRF2+氯胺酮组的凋亡率显著高于si-NC+氯胺酮组(P <0.001)。选取100μM 为褪黑素的工作浓度。KET组的IL-6mRNA表达水平(1.415±0.286)显著高于CON组(1.024±0.230)(P <0.01);KET+褪黑素组(1.026±0.344)的IL-6mRNA 表达水平显著低于KET 组(P <0.01);KET+褪黑素组SV-HUC-1细胞的SOD(20.521±1.351)显著高于CON组(15.461±2.018)(P <0.001)和KET组(15.763±2.216)(P <0.0001);KET 组SV-HUC-1细胞NRF2的表达丰度(0.428±0.101)低于CON组(1.500±0.081)(P <0.0001);KET+褪黑素组的NRF2表达丰度(0.804±0.100)高于KET组(P <0.01)。除此之外,KET+褪黑素的HO-1的表达丰度(1.419±0.098)高于CON 组(0.352±0.168)(P <0.0001)和KET组(0.199±0.046)(P <0.0001)。结论 褪黑素能够通过NRF2保护氯胺酮导致的尿路上皮损伤。