摘要:目的 通过比较表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对大鼠干细胞的直接作用和与成骨诱导液的协同作用探究EGCG在成骨分化中的作用。方法 利用全骨髓贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)。培养至第三代,将细胞分为四组:A组(BMSCs):单纯用完全培养基培养BMSCs;B组(BMSCs+EGCG):将BMSCs在添加10 μmol/LEGCG的完全培养基中培养;C组(BMSCs+Osteoinductive fluid):用成骨诱导液培养BMSCs;D组(BMSCs+Osteoinductive fluid+EGCG): 将BMSCs在添加10 μmol/LEGCG的成骨诱导液中培养。培养7天和14天,通过CCK-8检测细胞增殖情况,通过碱性磷酸酶(ALP)检测、ALP染色和成骨相关基因骨钙素(Ocn)、I型胶原(Col1a1)、骨涎蛋白(Bsp)、Runt相关转录因子2(Runx2)等的表达水平评估EGCG在大鼠干细胞成骨分化中的作用。结果 CCK-8检测发现C组和D组细胞增殖均明显低于A组和B组,但是C组与D组差异不显著,说明EGCG对大鼠干细胞的增殖影响不明显;ALP检测中A组与B组差异不显著,D组与C组比较差异有统计学意义,且ALP染色中D组染色明显高于C组,同时在成骨相关基因表达的检测中D组mRNA表达水平也明显高于C组,这些结果说明单纯EGCG对干细胞成骨作用比较微弱,但是在成骨诱导液存在时其成骨作用大大增强。结论 EGCG发挥促进成骨作用需要依赖其它因素,其自身不能启动成骨过程。