目的 探讨氢醌(HQ)对L02肝细胞DNA-PK表达的影响,明确DNA-PK在HQ所致肝细胞自噬中作用,为深 入探讨DNA损伤应答与自噬的关系提供科学依据。方法 将实验分为未处理对照组、DMSO 溶剂对照组、DNA-PK 抑制剂(NU7026)组、HQ组、NU7026+HQ组,处理时间为24h;采用CCK-8法检测L02肝细胞存活率;采用倒置显微镜观察细胞的形态变化;采用Westernblot方法检测L02肝细胞中DNA-PK、p62、Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ在蛋白水平上的表达情况;采用免疫荧光法检测DNA-PK蛋白的亚细胞定位特征。结果 CCK-8法检测结果显示,与对照组相比,HQ组和HQ+NU7026组细胞存活率有明显降低(P <0.01)。Westernblot结果显示,在浓度为0~40μM 的HQ作用下,DNA-PK蛋白的相对表达量有随着HQ 作用浓度的增加而升高的趋势;当HQ 作用剂量达到40μM 和80μM 时,DNA-PK的相对表达量高于对照组(P <0.01);与对照组相比,NU7026组和NU7026+HQ组提高了p62的表达水平;与HQ组相比,NU7026+HQ组对LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1和p62的表达无显著影响。免疫荧光实验结果显示,与对照组相比,实验组DNA-PK蛋白的荧光强度明显增强,各组DNA-PK 蛋白均只在细胞核中表达。结论 HQ 可诱导L02肝细胞DNA-PK和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平的增加,而对Beclin-1和p62蛋白的表达无影响;抑制DNA-PK 活性会增加L02细胞p62蛋白的表达水平,而对Beclin-1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白的表达无影响;DNA-PK可能会通过影响p62蛋白的表达而在肝细胞自噬过程中发挥作用。