目的 探讨miR-9-5p通过调控SIRT1及NF-κB表达对胰腺癌细胞(PANC-1)凋亡相关基因Caspase-3表达的 影响。方法 使用miR-9-5pmimic慢病毒转染人胰腺癌PANC-1细胞建立稳转株(mimic组),空载体转染作为阴性对 照组(NC组),以未处理的PANC-1细胞作为空白对照组(空白组)。采用qRT-PCR 检测PANC-1细胞中miR-9-5p、 SIRT1及Caspase-3mRNA的表达水平;WesternBlot检测SIRT1、NF-κB 通路相关蛋白及Caspase-3 蛋白表达量; ELISA检测细胞裂解液中SIRT1及Caspase-3蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验明确miR-9-5p和SIRT1的靶向关 系;Pearson相关分析确定miR-9-5p、SIRT1及Caspase-3mRNA表达的相互关系。结果 mimic组miR-9-5pmRNA表 达较对照组明显升高,结果有统计学意义,提示转染成功。与空白组及NC组相比,mimic组SIRT1mRNA 及蛋白表达 水平下调(P <0.01),p-NF-κBp65与NF-κBp65上调(P <0.01),Caspase-3mRNA及蛋白表达水平上调(P <0.01)。 双荧光素酶报告基因显示miR-9-5p可抑制野生型SIRT1细胞的荧光活性,miR-9-5p可靶向调控SIRT1的表达;Pearson 相关分析发现miR-9-5p和SIRT1的表达水平呈负相关(r =-0.849,P <0.05);miR-9-5p和Caspase-3的表达水 平呈正相关(r =0.796,P <0.05)。结论 过表达miR-9-5p可促进PANC-1细胞凋亡相关基因Caspase-3的表达,其 机制可能与靶向调控SIRT1继而调节NF-κB通路有关,这将为胰腺癌的诊断及治疗提供新的思路。