目的 探讨一种基于点击化学反应将PNA和引物进行连接的新方法,挖掘PNA-引物具有选择性扩增cffDNA 的潜力。方法 采用点击化学将PNA与引物进行连接,通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、高效液相色谱仪以及质谱分析 对PNA-引物进行表征。最后,以DNA短片段和长片段分别模拟cffDNA 和母源DNA,将包含相同摩尔质量的长短片 段混合溶液通过聚合酶链式反应确定连接后的产物性能。结果 PNA 与引物成功连接,且连接物同时具备二者的特 性。PNA-引物特异性富集DNA短片段的效率高达83.20%。结论 本研究构建的新方法有望从高母源性DNA 背景 下,选择性地富集cffDNA,该方法同时具有通量高、成本低的特点,为cffDNA的分离及纯化提供新的思路。