目的 胎儿游离DNA（cell-free fetal DNA，cffDNA）的有效富集，一直是制约无创产前诊断发展的重要因素之一。肽核酸（peptide nucleic acid，PNA）是一类以多肽骨架取代糖磷酸主链的DNA类似物。本研究报道了一种基于点击化学反应将PNA和引物进行连接的新方法，PNA-引物具有选择性扩增cffDNA的潜力。方法 采用点击化学将PNA与引物进行连接，通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、高效液相色谱仪以及质谱分析对PNA-引物进行表征。最后，以DNA短片段和长片段分别段模拟cffDNA和母源DNA，将包含相同摩尔质量的长短片段混合溶液通过聚合酶链式反应确定连接后的产物性能。结果 PNA与引物成功连接，且连接物同时具备二者的特性。PNA-引物特异性富集DNA短片段的效率高达83.20%。结论 本研究构建的新方法有望从高母源性DNA背景下，选择性地富集cffDNA，该方法同时具有通量高、成本低的特点，对于cffDNA的分离及纯化提供新的思路。