miR-9-5p通过SIRT1/NF-κB通路促进胰腺癌细胞凋亡的实验研究
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右江民族医学院附属医院

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    目的:探讨miR-9-5p通过调控SIRT1及NF-κB表达对胰腺癌细胞(PANC-1)凋亡相关基因Caspase-3表达的影响。 方法:使用miR-9-5p mimic 慢病毒转染人胰腺癌PANC-1细胞建立稳转株(mimic组),空载体转染作为阴性对照组(NC组),以未处理的PANC-1细胞作为空白对照组(空白组)。采用qRT-PCR检测PANC-1细胞中miR-9-5p、SIRT1、NF-κB p65及Caspase-3 mRNA的表达水平; ELISA检测SIRT1、NF-κB p65及Caspase-3蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验明确miR-9-5p和SIRT1的靶向关系;Pearson 相关分析确定miR-9-5p、SIRT1、NF-κB p65及Caspase-3 mRNA表达的相互关系。 结果:mimic组 miR-9-5p mRNA表达较对照组明显升高,结果有统计学意义,提示转染成功。与空白组相比,mimic组SIRT1 mRNA及蛋白表达水平显著下调(P<0.01),NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平下调(P<0.05),Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平显著上调(P<0.01);与NC组相比,mimic组SIRT1 mRNA及蛋白表达水平显著下调(P<0.01),NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平显著下调(P<0.01),Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。双荧光素酶报告基因显示 miR-9-5p可抑制野生型SIRT1细胞的荧光活性,miR-9-5p可靶向调控SIRT1的表达;Pearson相关分析发现miR-9-5p和SIRT1的表达水平呈负相关(r=-0.84;P <0.05);miR-9-5p和NF-κB p65的表达水平呈负相关(r=-0.8;P <0.05);miR-9-5p和caspase-3的表达水平呈正相关(r=0.8;P <0.05)。

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  • 收稿日期:2023-03-02
  • 最后修改日期:2023-03-13
  • 录用日期:2023-03-17
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