脱氧胆酸对HBV病毒复制及肝癌细胞自噬影响的研究
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R737.21

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    目的 观察脱氧胆酸(deoxycholicacid,DCA)对乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)复制的影响,及其对肝癌 细胞自噬的影响程度,探讨其可能的作用机制。方法 观察不同浓度DCA 对HepG2及HepG2.215细胞活性的影响, 进而测定不同浓度DCA对HepG2.215细胞HBVDNA的载量及HBsAg、HBeAg和HBcAg表达水平的影响,蛋白免 疫印迹检测自噬水平;将HepG2.215细胞转染乙型肝炎病毒X(HBX)蛋白突变表达质粒后,观察HBX对DCA 处理的 HepG2及HepG2.215细胞的HBVDNA载量以及HBsAg、HBeAg和HBcAg表达水平的影响,蛋白免疫印迹检测细胞 自噬水平。结果 ①CCK-8实验结果显示随着DCA 浓度的升高,细胞活力均呈现梯度下降趋势(P <0.01);② HepG2.215细胞的HBVDNA载量以及HBsAg、HBeAg、HBcAg水平均随着DCA 浓度的提高而上升(P <0.01);③ HepG2与HepG2.215细胞的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高(P <0.01),HepG2细胞的p62蛋白水平随着DCA浓度的升高 而下降(P <0.01),HepG2.215细胞的p62蛋白水平随着DCA 浓度的升高而上升(P <0.01);④未经DCA 处理的对 照组、经100μmol/LDCA 处理的对照组、未经DCA 处理的HBX 突变表达质粒转染组、经100μmol/LDCA 处理的 HBX突变表达质粒转染组的HBVDNA 载量、HBsAg、HBeAg、HBcAg水平、HBX蛋白水平以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值 均呈现依次上升趋势(P <0.01),p62蛋白水平呈现依次下降趋势(P <0.01)。结论 ①DCA 处理可以降低肝癌细胞 的活力;②DCA可以促进HBV 的复制;③DCA 可以促进HepG2细胞的自噬,在HepG2.215细胞中促进不完全自噬; ④DCA可以通过促进HBX蛋白的合成来加强HBV的复制,进而促进不完全自噬。

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