目的 探究高糖高脂诱导小鼠足细胞发生铁死亡的作用机制以及二甲双胍(Met)能否通过抑制铁死亡改善足 细胞损伤。方法 ①将小鼠肾足细胞(MPC-5细胞)分组:MPC-5细胞分别在正常组(葡萄糖浓度为5.6mM 的DMEM 培养基,Con组)、高糖组(葡萄糖浓度为33.3mM 的DMEM 培养基,HG组)、高脂组(葡萄糖浓度为5.6mM,棕榈酸钠 浓度为0.25mM 的DMEM 培养基,HP组)、高糖高脂组(葡萄糖浓度为33.3mM,棕榈酸钠浓度为0.25mM 的DMEM 培养基,GP组),孵育24h。②加入铁死亡抑制剂Fer-1处理:MPC-5细胞分别在Con组、GP组、GP+Fer-1组(MPC-5 细胞于铁死亡抑制剂Fer-1浓度为10μM 的DMEM 培养基中预处理2h,随后将培养基更换为葡萄糖浓度为33.3mM、 Fer-1浓度为10μM 的DMEM 培养基),孵育24h。③加入降糖药物处理:MPC-5细胞分别在Con组、GP组、GP+Met 组(MPC-5细胞于Met浓度为0.5mM 的DMEM 培养基中预处理2h,随后将培养基更换为葡萄糖浓度为33.3mM、 Met浓度为0.5mM 的DMEM 培养基)、GP+沙格列汀(Sax)组(MPC-5细胞于Sax浓度为100nM 的DMEM 培养基中 预处理2h,随后将培养基更换为葡萄糖浓度为33.3mM、Sax浓度为100nM 的DMEM 培养基)、GP+达格列净(Dap) 组(MPC-5细胞于Dap浓度为2μM 的DMEM 培养基中预处理2h,随后将培养基更换为葡萄糖浓度为33.3mM、Dap 浓度为2μM 的DMEM 培养基),孵育24h。分别检测各组细胞生存率、GSH/GSSG比值、脂质过氧化物含量、铁离子浓 度以及铁死亡相关蛋白(xCT、GPX4及ACSL4)的表达。结果 ①与Con组相比,HP组、GP组MPC-5细胞生存率降 低,GSH/GSSG比值下降,脂质过氧化物含量升高,铁离子浓度增加,GPX4表达下降,ACSL4表达上升。②GP组MPC- 5细胞在Fer-1作用下,细胞生存率增加,GSH/GSSG比值上升,脂质过氧化物水平下降,铁离子浓度降低,GPX4表达增 加而ACSL4表达下降。③GP组MPC-5细胞在3种降糖药作用下,细胞生存率均增加,GSH/GSSG 比值上升,脂质过 氧化物水平下降,铁离子浓度降低,GPX4表达增加而ACSL4表达下降,而其中Met的作用效果最为明显。结论 铁死 亡参与了GP引起的足细胞损伤过程,Met可通过GPX4/ACSL4轴抑制铁死亡改善足细胞损伤。