目的 构建天然人源化单重链噬菌体展示纳米文库,筛选出特异性靶向人表皮生长因子受体-2(HER-2)的单重 链抗体,作为后续嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞疗法的抗原靶向结构域。方法 分离志愿者的外周血,提取淋巴细胞中 的总RNA,逆转录为cDNA,根据重链抗体保守区域骨架区FR设计引物,扩增出抗体的人抗体重链可变区(VH)片段, 再利用噬菌体展示技术,重组到噬菌体中,建立天然的人单重链噬菌体纳米文库,筛选特异性靶向HER-2的噬菌体,应 用ELISA和流式细胞术检测抗体亲和力和特异性。结果 成功构建了人源化单重链噬菌体纳米文库,总库容达到5× 1010且多样性较好,并成功筛选到高亲和力的抗HER-2单重链抗体。结论 本研究成功筛选到了抗HER-2的单重链抗 体,并通过ELISA、流式等方法验证了其亲和力和特异性,为后续基于HER-2的抗体筛选与开发,以及临床肿瘤治疗奠 定基础。