摘 要：目的 构建天然人源化单重链噬菌体展示库，筛选出特异性靶向HER-2的单重链抗体，作为后续嵌合抗原受体T (CAR-T) 细胞疗法的抗原靶向结构域。 方法 分离志愿者的外周血，提取淋巴细胞中的总RNA，逆转录为cDNA后对DNA进行回收，根据重链抗体保守区域骨架区FR设计引物，扩增出抗体的VH片段，再利用噬菌体展示技术，重组到噬菌体中，建立天然的人单重链噬菌体文库，筛选特异性靶向HER-2的噬菌体，应用ELISA和流式细胞术检测抗体亲和力和特异性。结果 成功构建了人源化单重链噬菌体库，总库容达到5×1010且多样性较好，并成功筛选到高亲和力的抗HER-2单重链抗体。结论 成功筛选到了抗HER-2的单重链抗体，并通过ELISA、流式等方法验证了其亲和力和特异性，为后续基于HER-2的抗体筛选与开发，以及临床肿瘤治疗奠定基础。