目的 基于网络药理学方法和分子对接技术探讨蛹虫草代谢产物虫草素(Cordycepin)治疗舌鳞状细胞癌 (TSCC)的作用机制。方法 利用PubChem、PharmMapper、CTD和GeneCards数据库得到虫草素和人类TSCC相关靶 点、通过在线Venn网站得到虫草素-TSCC交集靶点。使用STRING 数据库构建蛋白互作网络(PPI),运用Cytoscape 3.10.1软件进行虫草素治疗TSCC的核心靶点筛选。在此基础上使用DAVID数据库进行基因本体论(GO)功能富集与 京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,利用Cytoscape软件构建虫草素治疗TSCC的“成分-靶点-通路” 网络图。运用AutoDock软件对虫草素和核心作用靶点进行分子对接验证。最后采用WesternBlot和RT-PCR技术检 测虫草素处理Tca-8113细胞的核心靶点表达情况。结果 分析获取虫草素作用靶点535个,TSCC疾病相关靶点1183 个,虫草素治疗TSCC的靶点210个。筛选出虫草素治疗TSCC的核心关键靶点为TP53、STAT3、AKT1。GO 生物学 过程富集分析显示,虫草素治疗TSCC主要涉及对激素的反应、细胞迁移、运动的正向调节、miRNA 代谢过程的调控、 miRNA转录调控、成纤维细胞增殖的调节、凋亡过程负向调控等多个生物过程。KEGG通路富集分析表明,涉及的通路 主要为癌症通路、人巨细胞病毒感染、脂质和动脉粥样硬化通路、化学致癌作用-受体活化通路、PI3K-Akt信号通路、 MAPK信号通路、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路以及c型凝集素受体信号通路等。分子对接结果显示,核心 靶点蛋白与虫草素具有较好的结合能力。WesternBlot和RT-PCR 结果表明虫草素可抑制舌癌细胞中TP53、STAT3 和AKT1的表达(P <0.01),且随虫草素浓度的增加,其抑制作用逐步增加。结论 虫草素可能通过TP53、STAT3和 AKT1等靶点调节AGE-RAGE、PI3K/Akt等信号通路发挥抗TSCC的作用,为其临床应用及其治疗TSCC的机制深入 研究提供了理论依据。