目的：探讨Obg-like ATPase 1（OLA1）对5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil ，5-FU）耐药的结直肠癌（CRC/5-FU）细胞的影响及作用机制。方法：利用qRT-PCR法和Western blot法检测CRC细胞和CRC/5-FU细胞中OLA1的表达水平，再利用基因工具干预CRC/5-FU细胞，将其分为阴性对照组（siNC）和敲低OLA1组（siOLA1），然后利用CCK8检测siNC 组和siOLA1组对5-FU的半数抑制浓度（IC50）。采用流式细胞术分析两组细胞凋亡率和细胞周期分布的变化，并通过western blot检测各组中活化的天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶（Cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase，Cleaved caspase3）、Bcl2-Associated X的蛋白质（Bcl2-Associated X，Bax）、B淋巴细胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）蛋白的表达水平。结果：CRC/5-FU细胞中OLA1表达量明显升高（P＜0.05）。 根据流式细胞术结果显示，siOLA1组细胞凋亡能力显著升高，细胞S期比例也明显升高。同时，siOLA1组中Cleaved caspase3、Bax蛋白表达水平显著升高，而Bcl-2蛋白表达水平则显著下降。（P＜0.05）。结论：OLA1可通过影响细胞凋亡相关蛋白表达，降低5-FU对CRC细胞的杀伤效果，由此提高结直肠癌细胞对药物的耐受性。